TRIM21 通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌细胞增殖及耐药

目的：探讨TRIM21 通过激活Wnt/β-catenin 信号通路调控卵巢癌细胞增殖以及PARP抑制剂耐药的相关机制。方法：收集2018 年1 月至2019 年1 月于延安市人民医院手术切除的8 例卵巢癌组织及宫颈上皮组织标本，并根据患者是否对PARP抑制剂尼拉帕尼耐药分为耐药组和非耐药组（4 例/组）；卵巢癌细胞系CAOV3、SKOV3、OVCAR3、ES-2、HO8910、A2780 和OV2008。用qPCR 法和Western blotting（WB）分别检测卵巢癌组织和细胞系中TRIM21 和β-catenin 表达水平。构建TRIM21 过表达及敲减细胞系，用CCK-8 法检测各组细胞的增殖活力，用TOP/FOP 双荧光素酶实验检测TRIM21 对Wnt信号通路激活的影响，qPCR法和WB检测TRIM21 对β-catenin mRNA和蛋白水平的影响，并通过Wnt通路抑制剂XAV-939 作进一步验证。结果：TRIM21 在卵巢癌组织中的表达水平显著高于宫颈上皮组织（P<0.01），且在耐药组织中表达水平较高（P<0.01）；TRIM21 在卵巢癌ES-2 细胞中表达水平相对最高，而在CAOV3 和A2780 中表达水平相对较低（均P<0.01）。敲减TRIM21 后，ES-2 细胞中TRIM21 的表达水平显著降低（P<0.01），细胞的增殖能力明显降低（P<0.01）；过表达TRIM21 后，CAOV3 细胞的增殖能力显著增强（P<0.01），并可抑制尼拉帕尼的抗肿瘤增殖活性，其可调控Wnt/catenin 通路的激活，而敲减β-catenin 或使用Wnt/β-catenin 抑制剂XAV-939 后，TRIM21 在卵巢癌中的作用被显著逆转。结论：TRIM21 可通过调控Wnt/β-catenin 信号通路增强卵巢癌细胞的增殖能力并在PARP抑制剂尼拉帕尼耐药过程中发挥一定的作用。     

空腹血糖与TG/HDL-C 对非糖尿病患者并发COVID-19 的预测价值研究

目的　探究空腹血糖与三酰甘油/ 高密度脂蛋白胆固醇(triglyceride/high density lipoprotein cholesterol, TG/HDL-C) 比值在对糖尿病患者并发新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019, COVID-19) 的预测价值。方法　连续收集2021 年12 月～ 2022 年1 月西安市第四医院收治的非糖尿病并发COVID-19 患者39 例，通过倾向性评分匹配同期西安交通大学第二附属医院健康体检者34 例( 健康对照组)，比较两组间临床特征与实验室检验指标，Logistic 回归及受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC) 曲线分析空腹血糖与TG/HDL-C 对非糖尿病患者并发COVID-19 的预测价值。结果　COVID-19 患者均为轻型(30 例) 或普通型(9 例)，整体症状较轻，中位年龄29.0 (20.0, 49.0) 岁，男性24 例(61.5%)，临床预后较好。COVID-19 患者入院时空腹血糖(4.30±0.47 mmol/L) 与HDL-C[1.07(0.86, 1.30) mmol/L]较健康对照组[5.15±0.70 mmol/L, 2.24(1.77, 3.05) mmol/L] 显著降低，差异具有统计学意义(t=6.277, P ＜ 0.001；Z =-6.026,P＜0.001)，而低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C) [2.40(1.81, 2.91) mmol/L] 与TG/HDL-C [0.91(0.54, 1.52)] 较健康对照组[1.11 (0.99, 1.30) mmol/L, 0.54 (0.33, 0.90)] 显著升高，差异具有统计学意义(Z=-6.271, -2.801,均P ＜ 0.005)。Logistic 回归分析显示入院时空腹血糖可能是非糖尿病患者感染COVID-19 的独立保护因素(OR :0.020,95% CI: 0.003 ～ 0.150)，TG/HDL-C 升高可能是COVID-19 发病的独立危险因素(OR :4.802, 95% CI: 1.249 ～ 18.460)。ROC 曲线结果显示，空腹血糖与TG/HDL-C 能较好地预测COVID-19 发病风险，曲线下面积(area under curve, AUC) 分别为0.871 和0.708，二者联合诊断的AUC 为0.895。结论　空腹血糖降低与TG/HDL-C 升高可能是非糖尿病人群并发COVID-19 的危险因素，对COVID-19 发病具有较好的预测价值。     

慢病毒介导的RNA干扰沉默KIF14表达对结肠癌细胞生长和转移的影响

目的:探讨慢病毒介导RNA干扰沉默KIF14表达对结肠癌SW480细胞生长和转移的影响。方法:采用脂质体法将构建的慢病毒靶向siRNA-KIF14干扰载体转入SW480细胞后，采用RT-PCR和Western blot检测KIF14 mRNA和蛋白的表达，MTT法、流式细胞仪和Transwell小室实验分别检测SW480细胞增殖、凋亡和侵袭，Western blot检测上皮-间质转化相关蛋白N-cadherin、E-cadherin和Vimentin的表达。结果:转染SW480细胞后成功下调KIF14 mRNA和蛋白的表达。与未转染细胞相比，下调KIF14的表达可抑制SW480细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化，并促进细胞凋亡（P＜0.05）。结论:下调KIF14表达可抑制结肠癌SW480细胞生长和转移。     

基于生物信息学筛选并分析男性肝癌患者发病中的关键基因

目的 筛选男性肝癌患者中的差异基因并分析探讨其对不同性别患者预后的影响。方法 在GEO数据库中获取男性肝癌患者的基因表达数据,通过GEO2R在线工具获取差异基因(DGEs)并在DAVIAD数据库中进行GO和KEGG富集分析;STRING数据库中进行差异基因网络互作分析(PPI),结合Ctoscape插件Cytohubaba获取前10位的关键基因,并且在GEPIA、Kaplan-Meier plotter数据库中分析其对不同患者预后的影响。结果 从GSE19665与GSE84002中分别筛选出男性患者与健康对照者的差异基因并取交集,最终得到162个DGEs;使用DAVID网站对DGEs进行聚类分析,GO功能富集分析显示DGEs主要参与细胞分裂、胞外区、铁离子结合等过程;KEGG分析显示DGEs主要参与细胞周期、卵母细胞减数分裂、p53等信号通路;使用STRING网站对DGEs做PPI网络互作分析,并用Ctoscape软件的MCODE和CytoHubba两个APP从PPI网络中分解关键网络分析核心基因获取了10个关键基因(CDCA8,CCNB2,BUB1,KIF20A,DLGAP5,BIRC5,CDC20,CDK1,ASPM,TOP2A);使用GEPIA网站查询得知TCGA数据中的核心基因均高表达;使用Kaplan-Meier plotter网站分析,细胞周期蛋白B2(recombinant cyclin B2,CCNB2)和有丝分裂相关基因(abnormal spidle microtubule assembly,ASPM)两个基因高表达且与男性患者预后差相关。结论 与女性肝癌患者相比,CCNB2和ASPM的高表达与男性肝癌患者整体生存期显著相关,可作为男性肝癌患者早期诊断和个性化治疗的靶向分子标志物。     

鼠神经生长因子、亚低温联合甲强龙在急性脊髓损伤中的应用及对氧化应激水平的影响

目的 探讨鼠神经生长因子、亚低温联合甲强龙治疗急性脊髓损伤的临床疗效及对氧化应激水平的影响。方法 选取2016年5月—2018年6月延安大学附属医院收治的急性脊髓损伤患者132例作为研究对象。按随机数字表法分为对照组和观察组,每组66例。对照组静脉滴注甲强龙,初始剂量为30 mg/kg,随后以5.4 mg/（kg·h）的速度持续静脉滴注23 h,同时给予亚低温治疗,降温同时给予静脉滴注冬眠合剂维持24 h;观察组在对照组的基础上,肌内注射鼠神经生长因子30 g/d,持续给药2个月。观察两组患者脊髓功能恢复情况,包括：ADL、运动、触觉及针刺觉检查评分;观察血清GSH-Px和SOD的变化,追踪两组患者的并发症。结果 两组患者治疗后ADL、运动、触觉及针刺觉检查评分较治疗前升高（P <0.05）;观察组的评分高于对照组（P <0.05）;两组患者治疗后血清GSH-Px和SOD水平较治疗前升高（P <0.05）;观察组的氧化应激水平高于对照组（P <0.05）;两组患者并发症发生率差异无统计学意义（P >0.05）。结论 在甲强龙背景治疗下,鼠神经生长因子联合亚低温能促进急性脊髓损伤患者的神经功能恢复,提高患者的生活质量。     

坎地沙坦联合尿毒清颗粒治疗肾病综合征患者的临床疗效观察

目的探讨坎地沙坦联合尿毒清颗粒治疗肾病综合征(NS)患者的临床疗效。方法以2018年1月~2020年1月我院收治的106例NS患者为对象,按照随机数字表法分为对照组与观察组。对照组采用坎地沙坦治疗,观察组加用尿毒清颗粒治疗。对比两组临床疗效。结果两组治疗后血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量水平降低,白蛋白(ALB)水平升高,观察组变化程度高于对照组(P<0.05)。两组治疗后甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、D二聚体(D-D)、纤维蛋白原(Fbg)水平降低,观察组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后病情、体力、心理功能、一般生活功能、工作状况评分升高,观察组高于对照组(P<0.05)。结论坎地沙坦与尿毒清颗粒治疗NS的效果较好,可改善患者肾功能,调节患者的脂质代谢及凝血功能,提升患者的生活质量。     

基于HIV检测分析对无偿献血人群HIV筛查策略及归队的探讨

目的 对陕西省域内无偿献血者进行人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）检测,分析省域内无偿献血人群HIV流行情况,以期为制定适宜的血液筛查策略和献血者归队方法提供数据与理论依据。方法 选定有区域代表性的陕西省西安市、延安市与安康市3家中心血站的无偿献血者血液样本进行2种四代酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）和病毒核酸检测（nucleic acid testing,NAT）HIV,将所有检测呈反应性的样本进行确证试验。结果 对290 341例无偿献血者进行HIV筛查,总计352例初检结果为不合格（含1例ELISA^-/NAT⁺有反应性）,筛查反应率0.12%;所有样本送至属地市疾控中心检测,最终确证阳性11例（含核酸检测阳性1例）,确证阳性符合率3.79/10万。结论 陕西省域内无偿献血者中HIV阳性符合率低,提示目前无偿献血者HIV的血液筛查策略有待改进,同时也为献血者归队提供一定的理论支持。     

长链非编码RNA HIF1A-AS2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的检测LncRNA HIF1A-AS2在结直肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。 方法选取2012年12月至2015年12月行结直肠癌患者根治术的114例结直肠癌患者临床病理资料;收集其癌组织及相对应的癌旁组织(距病灶2 cm)和正常组织(距癌灶边缘>5 cm)标本。通过qRT-PCR检测结直肠癌组织、癌旁组织及癌旁正常组织中HIF1A-AS2相对表达水平。取114例入组患者HIF1A-AS2表达水平的平均数,将HIF1A-AS2表达水平大于等于平均数的89例纳入高表达组,其余纳入低表达组;分析HIF1A-AS2表达与临床病理特征之间的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析两组患者术后5年生存情况,Log-rank检验比较生存差异;COX比例风险回归模型分析预后不良的独立危险因素;P<0.05为差异有统计学意义。 结果结直肠癌组织中HIF1A-AS2相对表达量高于癌旁组织及正常组织(P<0.001)。HIF1A-AS2表达与临床分期及组织分化程度显著相关(P<0.05)。HIF1A-AS2高表达组患者术后5年总生存率低于HIF1A-AS2低表达组(Log-rank χ²＝5.037, P＝0.025)。COX多因素分析显示淋巴结转移、临床分期Ⅳ期、中-低分化、有远处转移及HIF1A-AS2显著高表达是影响结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。 结论结直肠癌组织中HIF1A-AS2显著高表达,与临床病理及预后密切相关,是影响结直肠癌患者预后不良的危险因素之一。     

血管肌纤维母细胞瘤临床病理分析

目的:观察并分析血管肌纤维母细胞瘤(angiomyofibroblastoma,AMF)的临床病理特点、影像学特征及治疗方法和预后。方法:回顾分析2015年至2019年诊断的5例AMF患者的临床资料,观察其临床特征、病理形态学特点及免疫组化结果等。结果:5例患者均为生育期女性,肿瘤位于外阴,临床以及实验室检查均缺乏特征性表现。镜下肿瘤边界清楚,并见大量的小到中等的薄壁血管。瘤组织由交替分布的细胞密集区和疏松区组成,密集区瘤细胞聚集于血管周围,成束或链状排列;疏松区瘤组织弥散于黏液背景中。免疫组化显示肿瘤细胞均表达Desmin、Vimentin、ER、PR,不表达CD31、CD34、S100、CKPan,1例表达SMA。结论:血管肌纤维母细胞瘤是种罕见的间叶组织肿瘤,好发于生育期的女性外阴,主要依据病理活检及免疫组化来明确诊断,首选手术切除以达到治疗效果。     

喉鳞状细胞癌的转录组数据分析及生物标志物筛选

目的通过数据挖掘分析长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)和信使RNA(mRNA)在喉鳞状细胞癌中的相互作用机制。方法从肿瘤基因图谱(TCGA)中获取喉鳞状细胞癌的lncRNA、miRNA、mRNA表达谱数据及相关临床数据,从TCGA和GEO数据库中获取喉鳞状细胞癌的DNA甲基化数据。进行蛋白相互作用(PPI)、基因文本(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路分析和Kaplan-Meier生存分析,构建竞争性内源RNA(ceRNA)网络和转录因子调控网络。结果LINC00278、LINC00689、MYHAS、miRNA-99a和miRNA-301a属于低风险基因(HR﹤1);MNX1-AS1、LINC02575、HOXB-AS4、LSAMP-AS1、LINC02086、IGFL2-AS1、LINC02253、CASC20、miRNA-383、miRNA-196a-2、miRNA-196a-1、miRNA-100和miRNA-4652属于高风险基因(HR﹥1)。ceRNA网络中有11个lncRNA(LINC02576、LINC02086、AC020659.1、LINC00528、LINC00689、HOXB-AS4、MNX1-AS1、LINC00278、AC010624.1、AC016773.1、MYHAS)、5个miRNA(has-miRNA-206、has-miRNA-573、has-miRNA-3662、has-miRNA-133b、has-miRNA-449a)和12个mRNA(STC2、PAX3、NETO2、EIF5A2、ADPRHL1、SYNM、ACTA1、GPR156、CLIC5、BMP3、HNF4A、FOXL2)。MYHAS的共表达mRNA(cor-mRNA)主要富集在钙信号通路、环磷酸鸟苷(cGMP)-cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)信号通路和催产素信号通路等。转录因子网络中有9个转录因子(MYOD、RSRFC4、TAL1BETAITF2、YY1、P300、PAX3、PAX5、ZID和OLF1)。喉鳞状细胞癌DNA甲基化分析得到75个甲基化位点,对应高甲基化基因56个,低甲基化基因15个。结论ceRNA网络并不能完全阐释lncRNA、miRNA和mRNA在喉鳞状细胞癌发生中的作用机制,lncRNA、miRNA和mRNA在喉鳞状细胞癌发生过程中既相互联系又相互独立。筛选出的lncRNA、miRNA和mRNA为试验验证缩小了范围并提供了理论基础。MYHAS在喉鳞状细胞癌中发挥重要作用,是一个潜在的生物学靶点。